凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)有哪幾個步驟呢

點擊次數(shù)：1626 更新時間：2023-02-28

凱氏定氮儀是根據(jù)凱氏定氮法設(shè)計的用于測定化合物或混合物中總氮量的一種儀器責任製。使用前需要校準(zhǔn)的項目有空白試驗善於監督、回收率的測定、儀器的測量重復(fù)性高質量。

凱氏定氮儀樣品消化

濃硫酸具有脫水性和氧化性也逐步提升，可使有機(jī)物中的碳、氫被氧化為二氧化碳和水註入了新的力量，蛋白質(zhì)會分化為氨重要的作用，然后氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。一般參加硫酸鉀和硫酸銅作為催化劑來加速蛋白質(zhì)分化去創新。硫酸鉀能夠行進(jìn)溶液的沸點足夠的實力，一般情況下，純硫酸的沸點在340℃左右結構，可是在添加硫酸鉀后更適合，可行進(jìn)至400℃以上。行進(jìn)溫度使有機(jī)物加速分化溝通協調∫嘏渲酶母?？墒遣荒軈⒓舆^多的硫酸鉀，不然會因為溫度過高保障性，使生成的硫酸銨發(fā)生熱分化成氨而構(gòu)成丟掉帶動產業發展。硫酸銅除作為催化劑外責任製，還能夠指示消化完畢的抵達(dá)，有機(jī)物悉數(shù)消化后倍增效應，溶液呈現(xiàn)清澈的藍(lán)綠色規則製定，硫酸銅還能夠做蒸餾時堿性反響的指示劑。

凱氏定氮儀蒸餾

消化液中的硫酸銨在堿性環(huán)境下會轉(zhuǎn)化成氨多樣性。為避免水中微量的氨氣受熱逸出，影響測定效果新格局，所以水蒸氣發(fā)生器中的水要堅持酸性明顯。硫酸銨是一種強(qiáng)酸弱堿鹽，需求滿足的堿液使結(jié)合態(tài)的氨反響并釋放出來顯示，這個進(jìn)程中的氫氧化鈉一定要過量創新為先，過量的氫氧化鈉會與硫酸銅生成藍(lán)色的氫氧化銅堆積，氫氧化銅受熱分化成黑色的氧化銅堆積科普活動。查驗蒸餾是否結(jié)束競爭力，可用奈氏試紙法，NH4+或NH3遇奈氏試劑會反響生成棕赤色的銨化合物狀況。

凱氏定氮儀吸收

加熱蒸餾放出的氨可用硼酸溶液吸收機製性梗阻，硼酸有吸收氨的效果，又因其呈微小酸性全過程，不影響下一步滴守時指示劑的變色反響集成應用。溫度過高會使硼酸吸收液對氨的吸收效果削弱，然后構(gòu)成丟掉不負眾望，故一般不逾越40℃高效流通。

凱氏定氮儀滴定

待吸收完后，用硫酸或許鹽酸規(guī)范溶液進(jìn)行酸堿滴定精準調控，滴定液的濃度直接影響效果的準(zhǔn)確性功能，有必要按照要求進(jìn)行制作和標(biāo)定〗鉀Q；旌现甘緞┰谥行匀芤褐谐驶疑A期，滴定完畢時液體呈灰色。

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